Jak je mycelium užitečné?

Houby jsou všude. Jsou uvnitř i kolem nás. Tyto úžasné organismy jedí kameny, vytvářejí půdu, tráví znečišťující látky, oplodňují a zabíjejí rostliny, přežívají ve vesmíru, způsobují vize, produkují potravu a léky, manipulují s chováním zvířat a ovlivňují složení atmosféry. Poskytují klíč k pochopení procesů probíhajících na planetě Zemi, a dokonce i našich pocitů, myšlení a jednání. Život hub je však před zvědavými pohledy skrytý: více než 90 % jejich druhů není ani registrováno.

Kdo je houba

Říše hub je velká a rozmanitá jako zvířata a rostliny a někteří její zástupci mají dokonce známky primitivní inteligence. Během experimentu provedeného v roce 2000 japonští vědci prokázali, že mycelium je schopno provádět buněčné výpočty: shromažďovat a systematizovat data o životním prostředí, určovat jeho polohu v prostoru a přenášet přijaté informace do jiných částí mycelia.

Co jste o houbách nevěděli

— Oregonské monstrum. Mycelium medové houby je považováno za největší živý organismus na planetě. Vyvíjí se v lesní rezervaci Malheur v Oregonu v USA. Jeho rozloha je více než 880 hektarů a jeho stáří je přibližně 2,4 tisíce let. Tento obří organismus byl nalezen kvůli masivní smrti stromů: mycelium obaluje kořeny rostlin a infikuje je medovou houbou.

— Přitažlivost země. Celková hmotnost uhlíku obsaženého ve všech živých organismech na planetě je asi 550 gigatun (Gt). Většina této hmoty připadá na rostlinný svět – 450 Gt (80 %), na druhém místě jsou bakterie – 70 Gt (asi 13 %) a na třetím místě je říše hub, 12 Gt (2 %). Pro srovnání, celková hmotnost lidí je ubohých 0,06 Gt (přibližně 0,01 %).

— Zombie houby. Nejvynalézavější manipulátory, které řídí chování zvířat, jsou skupiny hub, které žijí v tělech hmyzu.

Například Ophiocordyceps unilateralis žije v tesařských mravencích. Jakmile se houbou nakazí, ztratí instinktivní strach z výšek, opustí svá relativně bezpečná hnízda a vyšplhají na nejbližší rostlinu v oblasti s vhodnou teplotou a vlhkostí, aby umožnily novému hostiteli nést ovoce. V průběhu času parazit způsobí, že mravenec zatne čelisti kolem rostliny. V této neobvyklé poloze oběť zemře a mycelium proroste jejími nohami a připoutá ji k povrchu. Poté houba stráví tělo hmyzu a z její hlavy se vynoří stonek, ze kterého spóry padají na příbuzné zesnulého běžící dole po zemi.

Houby a lidé

O sluchátkách z umělé kůže a mycelia jsme již psali, ale to je jen malá část jeho jedinečných a rozmanitých superschopností. Pomocí hub můžeme vytvářet a ničit svět kolem nás, zachraňovat lidi a cestovat do jiné reality. Mykofabrikace je slibný směr spojený s využitím hub v různých sférách života: textilní průmysl, stavebnictví, design atd.

Houby v medicíně

Léčivé vlastnosti hub jsou známy již dlouhou dobu. Například domorodí obyvatelé Austrálie léčili rány plísní nasbíranou ze stinné strany eukalyptů a dokonce i na egyptských papyrech z XNUMX. století před naším letopočtem. E. Hovoří také o jeho léčivém účinku.

Teprve v roce 1928 Alexander Fleming objevil, že plíseň produkuje speciální bakteriostatickou látku. Říkalo se mu „penicilin“ a stalo se prvním moderním antibiotikem, které zachránilo nespočet životů.

Flemingův objev je považován za jednu z epochálních událostí v dějinách medicíny.

Na molekulární úrovni jsou si houby a lidé dost podobní a ukázalo se, že penicilin nás také může chránit před bakteriální infekcí. 15 % všech moderních vakcín je vyrobeno umělými kvasinkovými kmeny.

Psilocybin se stále častěji používá k léčbě deprese. V klinické studii provedené v roce 2016 se stav 19 dobrovolníků s touto diagnózou zlepšil týden po dvou léčbách. Testování progresivní léčby nyní probíhá na větším vzorku. V Rusku je psilocybin zařazen na seznam omamných látek, jejichž oběh je v zemi zakázán.

Houby v ekologii

– Kosmetický průmysl. Jednotlivě balené masky a další kosmetické produkty tohoto druhu jsou obvykle vyrobeny z plastu nebo pěnových polymerů. Ekologické alternativy zahrnují náplasti, houbičky na make-up, pleťové masky, oddělovače prstů a myceliové spa pantofle.

Technologie MycoFlex™ vám umožňuje postarat se o sebe způsobem šetrným k životnímu prostředí. Po použití lze produkty kompostovat.

Houba na obličej vyrobená z mycelia. Zdroj

Pleťová maska ​​vyrobená z mycelia. Zdroj

– Balíček . Americká společnost Ecovative Design pěstuje nové udržitelné materiály z kořenové struktury hub. Pro zvýšení hustoty produktu se do mycelia přidávají různé organické zemědělské odpady – slupky z ovesných, pohankových a bavlníkových zrn. Balíček naroste do požadované velikosti, poté se vyjme z formy a vysuší.

Obal na skleněnou láhev na bázi mycelia. Zdroj

Technologie pro takovou výrobu umožňují „přizpůsobit“ strukturu mycelia s ohledem na požadované výkonnostní charakteristiky materiálu. Volba pórovitosti, textury, pevnosti, pružnosti, orientace vláken a tvaru je na zákazníkovi. Nový produkt je umístěn jako ekologická alternativa k plastu. IKEA se proto rozhodla nahradit všechny obaly svých výrobků z pěnového polystyrenu obaly z mycelia.

— Likvidace nedopalků cigaret. Houby lze přimět k tomu, aby jedly nedopalky cigaret, použité plenky, úniky oleje a dokonce i radiaci. Mykolog-samouk a zakladatel Radical Mycology Peter McCoy vyvíjí technologie pro řešení mnoha technologických a ekologických problémů, kterým lidstvo čelí.

Například učil houbu Pleurotus strávit, možná nejběžnějším odpadkem na světě jsou nedopalky, a to o 6,5 bilionu kusů každý rok, tedy 18 miliard za den. Toxické zbytky narušují přirozený proces rozkladu.

Postupem času se houba naučila využívat cigaretový odpad jako jediný zdroj potravy. Mycelium neustále prosakovalo vzhůru sklenicí naplněnou zmačkanými nedopalky z cigaret potřísněnými dehtem. A brzy se dokonce dostal ven.

Popelník vyrobený z mycelia. Zdroj

Bruselčanka Audrey Speyer založila startup PuriFungi a vyvinula „živý“ popelník z hub, které tráví nedopalky rychleji, než to dokáže příroda – od 2 do 8 týdnů.

Houby v designu

— Lampy vyrobené z mycelia. Průmyslový designér Jonas Edward vytvořil lampy MYX z rostlinných vláken a houbového mycelia. Ve formě „dozrávají“ 2–3 týdny, zatímco se hromadí pružná a měkká živá tkáň. Poté můžete sklízet zdravé hlívy ústřičné a lampu lze sušit a používat k určenému účelu. Bio bytový dekor je šetrný k životnímu prostředí a snadno kompostovatelný.

Lampa vyrobená z mycelia. Zdroj

Mycelium stabilizuje strukturu a „slepuje“ ji dohromady. MYX se vyrábí z odpadních materiálů: houbový organismus pochází z komerční farmy a rostlinná vlákna jsou zbytkový materiál z textilního průmyslu.

— Nábytek vyrobený z mycelia. Výzkumná skupina pro architekturu a design Terreform vytvořila nábytek, jehož segmenty jsou vypěstovány z kmenů hub. Vynálezci používají polyporézní druh (v tomto případě Ganoderma lucidum), který produkuje enzymy pro rychlé trávení vedlejších zemědělských produktů na bázi celulózy.

Plnivo se skládá z podhoubí, vyřazených dřevěných třísek, sádry a ovesných otrub, které jsou konzumovány houbami a poté ztvrdnou a vytvoří pevný, odolný a funkční materiál. Vnější část je biopolymer, směs mycelia a celulózy.

Tato nízkoenergetická a energeticky nenáročná výroba nepoškozuje životní prostředí. Na konci svého životního cyklu lze houbový nábytek kompostovat a přirozeně se rozloží bez znečištění půdy.

Designér Eric Klarenbeck vyvinul 3D tištěnou židli pomocí živé houby, vody a práškové slámy, která slouží jako živná půda pro hlívu ústřičnou.

Židle vyrobená z mycelia. Zdroj

Mycelium se vyvinulo uvnitř rámu, „nahrazovalo“ vodu a vytvořilo tvrdý, ale extrémně lehký materiál. Na povrchu začaly růst houby a ve chvíli, kdy byla židle plně zformována, byla celá konstrukce vysušena.

Z tohoto materiálu lze vyrobit nejen nábytek, ale celý interiér nebo dokonce celý dům.

Houby ve stavebnictví

Výrobky vyrobené z mycelia nejsou v žádném případě horší než cihly, dřevotřískové desky a jiné stavební materiály: jsou lehké, odolné proti vodě a ohni, pevnější než beton pod vnějšími vlivy a lepší než pěnový plast v izolačních vlastnostech.

Ecovative pěstuje udržitelnou, vysoce výkonnou desku Myco, která nahrazuje umělé dřevo. Místo agresivních látek, které se používají při výrobě klasických bloků, se zde používá přírodní, rychle obnovitelné mycelium.

Bloky vyrobené z mycelia. Zdroj

Tento materiál je následně stlačen pomocí tepla a tlaku do desek nebo jiných tvarů. Dá se vypěstovat v neomezeném množství za pár dní a na konci použití se dá zkompostovat nebo použít jako hnojivo.

Houby v potravinářském průmyslu

Na základě hub lze vyrábět analogy živočišné potravy.

Atlast využívá fermentaci v pevné fázi (kultivaci mikroorganismů na substrátu s nízkou vlhkostí), aby umožnila myceliu růst do koherentní struktury. Tento produkt vyžaduje minimální zpracování a má texturu podobnou krájenému masu.

Příprava na slaninu z mycelia. Zdroj

Může mít téměř jakýkoli tvar a chuť. Například k výrobě slaniny se čerstvý kousek nakrájí na nudličky, připraví se speciální lák a naloží se do uzené omáčky. Chuť a vůně výsledného produktu jsou téměř totožné s originálem.

Smažená slanina z mycelia. Zdroj

Veganský steak, kuřecí prsa a slanina jsou plné bílkovin, živin a tuku.

Michail Višněvskij, Kandidát biologických věd, mykolog: „Houby se již dlouho staly nedílnou součástí různých inovativních technologií. Bez nich nemůže fungovat jediný moderní průmysl: výroba látek, dřeva, výroba léků, biochemie, počínaje kyselinou citrónovou a konče jakoukoli složitou organickou hmotou. Vývoj probíhá desítky let a nyní dosáhl svého vrcholu. V poslední době bylo objeveno mnoho funkcí a vlastností, které dříve nebyly ani tušené.

Houby se začaly využívat v nových směrech. Dostávají se například na vrchol v boji proti znečištění životního prostředí jakéhokoli druhu, včetně radioaktivních prvků a těžkých kovů. Čištění půdy a vody bez hub je dnes zcela nemyslitelné: ty nejjemnější filtry jsou vyrobeny z mycelia.

Živé kvasinky také odstraňují organickou hmotu z různých kanalizací.

Houby se začínají aktivně využívat v zelené výstavbě. Vyrábí se z nich předměty pro domácnost a interiér a někdy i celé domy na bázi podhoubí, které je srostlé s určitým substrátem. Poté se upeče a stane se pevným, tvrdým a lehkým. A nudný předmět lze hodit přímo do deště – zcela se rozloží, aniž by poškodil životní prostředí.

Vývoj chytrého betonu již probíhá (i když zatím ne v průmyslovém měřítku): pokud dojde k prasknutí nebo poškození, takový materiál se sám zacelí.

Mycelium se aktivně používá v zemědělství, protože některé houby ničí škodlivý hmyz, rostliny a dokonce i jiné houby. Mohou sloužit jako kompletní náhrada živočišného masa (s výjimkou vitaminu B12).

Myslím si, že v následujících desetiletích se v důsledku vědeckotechnického pokroku oblast využití hub výrazně rozšíří a budou hrát v našich životech ještě výraznější roli.

Taková řešení dosud nebyla zavedena do sériové výroby z několika důvodů.

Za prvé, ekonomické faktory. Jedna věc je zahájit řemeslnou výrobu a druhá dosáhnout průmyslového objemu. To vyžaduje velké investice, stejně jako ambiciózní reklamní kampaně a další marketingové nástroje.

Ekologicky a bio orientovaných lidí není mnoho a bohatých je mezi nimi ještě méně. Drtivá většina bude počítat peníze, ale zatím jsou takové produkty dražší než jejich konvenční protějšky. Globální změny v tomto odvětví nenastanou, dokud nebude vše na průmyslovém základě s nízkými náklady a přijatelnou cenou pro většinu populace.

Například umělé maso již existuje a vyrábí se, ale stojí více než přírodní maso. Až zlevní, mnozí na takové produkty rádi přejdou.

Za druhé, tento proces je brzděn setrvačností spotřebitelského myšlení a silou zvyku. Ne každý bude riskovat, že si koupí boty z umělé houbové kůže nebo židli z mycelia.“

Přečtěte si také

Je pravda, že houby udělaly člověka z opice?

Účinná látka mnoha druhů kouzelných hub je klasifikována jako psychedelická. Patří mezi enteogeny – skupinu rostlinných látek, které mohou způsobit hluboké prožitky podobné náboženské extázi. Jeho použití mění vědomí a vnímání. Účinky se pohybují od sluchových, zrakových a snových halucinací až po hluboké změny v kognitivním a emocionálním stavu a ztrátu smyslu pro čas a prostor.

Excentrický spisovatel, filozof a etnobotanik Terence McKenna upozornil na klíčovou roli halucinogenních hub v historii lidské společnosti. Podle jeho názoru jejich konzumace určovala biologický, kulturní a duchovní vývoj našeho druhu.

Náboženství, složitá společenská organizace, obchod a nejstarší umění se objevují během relativně krátkého období historie – přibližně před 50-70 tisíci lety. Existuje mnoho hypotéz vysvětlujících, co způsobilo tento kulturní průlom. McKenna ale věří, že to byly houby, které vyvolaly první záblesky lidské reflexe, jazyka a spirituality.

“Kouzelné houby. Zdroj

Ve své knize Food of the Gods badatel navrhl, že zhruba ve stejné době, kdy se Homo erectus vyvíjel v Homo sapiens, připravila změna klimatu v Africe rané lidi o některé z jejich primárních zdrojů potravy. McKenna věřil, že primitivní kmeny sledovaly migrační trasy divokých stád hospodářských zvířat, která produkovala hnůj. Dobře v něm rostou houby a k odpadním produktům velkých zvířat se slétává i hmyz, který se po přemnožení dostává do potravy a stává se součástí nového jídelníčku nomádů. Tak došlo k nedobrovolnému seznámení člověka s psychedeliky.

Podle McKenny houba stimulovala mozky raných lidí, což vedlo ke vzniku jazyka, vizuálního umění, hudby, tance a náboženství. Jako důkaz poukázal na „psychedelické“ jeskynní malby a další ilustrace hub vytvořené našimi vzdálenými předky.

Může to být zajímavé

Michail Višněvskij: „Z evolučního i biologického hlediska teorie Terence McKenny, jak ji formuloval sám autor, neobstojí v kritice.

Spoléhal na výzkum Ronald Fisher, kde tvrdil, že houbový halucinogen ovlivňuje (někdy i pozitivně) některé vlastnosti zraku. Na základě této teze McKenna kategoricky usoudil, že lidé, kteří jedli takové jídlo, začali celkově lépe vidět.

A ve výsledku je efektivnější lovit a rozvíjet hmotnou a duchovní kulturu. Stali se laskavějšími a sympatičtějšími, jejich ego se zmenšilo a v důsledku toho se z nich stalo moderní lidstvo. McKenna věřil, že halucinogenní houby vytvořily humánní společnost.

Stačí se ale podívat na aztécké či mayské civilizace, jejichž kněží tyto látky také aktivně užívali, abychom se přesvědčili o opaku: krev z obětních pyramid tekla po celý rok bouřlivým proudem a zvěrstva, mučení a popravy byly hlavním důvodem. norma společenského chování.

Vezmeme-li však v úvahu příliš extravagantní a ne zcela vědecká tvrzení o zlepšování zraku a polidšťování lidí, je v teorii Terence McKenny také racionální zrno. Můžeme například skutečně předpokládat, že účinná látka halucinogenních hub posilovala kognitivní schopnosti a mozkovou aktivitu primátů obecně a Homo sapiens zvláště.

Nedávno se ukázalo, že náš druh na takové organické sloučeniny reaguje mnohem citlivěji než šimpanzi, gorily a další blízcí příbuzní lidí podél evolučního stromu. Tato vlastnost je v nás přítomna několik milionů let.

Halucinogeny z hub ve skutečnosti podporují vznik nových nervových spojení v mozku, což znamená, že by mohly ovlivnit vývoj Homo sapiens jako inteligentních tvorů. Takový účinek by nepochybně vedl ke vzniku a rozvoji raných forem víry, jako je šamanismus ve všech jeho podobách. A energická duševní činnost a utváření náboženských představ založených na vizích by rozhodně přispělo k pokroku společnosti.“

Z plodnic byly izolovány tři kmeny houby Daedaleopsis tricolor do čisté kultury. Vodné a ethanolové extrakty byly získány z plodnice a kultivovaného mycelia houby Daedaleopsis tricolor. Extrakty se vyznačují hlavními skupinami biologicky aktivních látek: polysacharidy, proteiny, triterpeny, karotenoidy, fenolické sloučeniny, flavonoidy. Bylo zjištěno, že výtěžnost extraktivních látek z mycelia je 3–5krát vyšší než z plodnice, přičemž obsah některých skupin biologicky aktivních látek v extraktech z plodnic houby je 2–4krát vyšší než v extraktech z mycelia. Bylo provedeno srovnání extraktů získaných z plodnic a kultivovaného mycelia z hlediska biochemického složení a biologické aktivity. Bylo zjištěno, že extrakty z houby Daedaleopsis tricolor mají antioxidační a protinádorovou aktivitu, zatímco extrakty z kultivovaného mycelia vykazují ve většině případů vyšší biologickou aktivitu.

1. Kovaleva A.V., Kuzminykh O.V., Lashchenko E.Yu., Dreval K.G., Kanibolotskaya L.V., Boyko M.I., Shendrik A.N. Antioxidační vlastnosti dřevokazných makromycetů // Bulletin Doněcké národní univerzity. – 2013. – č. 1. – S. 136–139.

2. Kosogová T.A. Kmeny basidiomycetes z jihu západní Sibiře jsou slibnými producenty biologicky aktivních léčiv: abstrakt. diss. . bonbón. biol. Vědy, 03.01.06/2013/26. Koltsovo, XNUMX. – XNUMX s.

3. Kudinová S.P., Kazaryan R.V., Remizová E.B., Kunschikova I.S. RF patent č. 1730578. Způsob stanovení množství p-karotenu v produktech obsahujících protein.

4. Troshkova G.P., Kostina N.E., Protsenko M.A., Skarnovič M.A. Optimalizace technologie pro získávání suchého extraktu z houby Fomes fomentarius // Moderní problémy vědy a vzdělávání. – 2012. – č. 4.

5. Fedoseeva A.A., Lebedkova O.S., Kanibolotskaya L.V., Shendrik A.N. Antioxidační aktivita čajových nálevů // Chemie rostlinných surovin. – 2008. – č. 3. – S. 123–127.

6. Bendiabdellah A., Dib M., Meliani N., Djabou N., Allali H., Tabti B. Předběžný fytochemický screening a antioxidační aktivity rozpouštědlových extraktů z Daucus crinitus Desf., z Algeria Journal of Applied Pharmaceutical Science. – 2012. – č. 02 (07). – S. 92–95.

7. Ikekawa T., Nakanishi M., Uehara N., Chihara G., Fukuoka F. Protinádorové působení některých Basidiomycetes, zejména Phellinus linteus // Jap. J. Canc. Res. – 1968. – č. 59. – S. 155–157.

8. Eun-Mi Kim, Hae-Ryong Jung, Tae-Jin Min. Purifikace, stanovení struktury a biologické aktivity 20(29)-lupen-3-onu z Daedaleopsis tricolor (Bull. ex Fr.) Bond. et Sing. Struktura, Biologická aktivita Substance u D. tricolor Bull. Korean Chem. Soc. – 2001. – V. 22. – č. 1.

Hledání nových zdrojů biologicky aktivních sloučenin za účelem získání účinných a bezpečných léčiv je jedním z nejdůležitějších úkolů moderní biotechnologie. Je známo, že vyšší bazidiomycety obsahují širokou škálu různých biologicky aktivních sloučenin, jako jsou polysacharidy, proteiny, fenolické sloučeniny, triterpeny, melaniny, karotenoidy, které mají různé biologické aktivity. Složitost a rozmanitost chemického složení bazidiomycet určuje jejich široké spektrum účinků na organismus. Získávání účinných a produktivních kmenů v čisté kultuře umožňuje využít pokroky v oblasti biotechnologie k získávání biomasy houbového mycelia v průmyslových podmínkách. Izolace biologicky aktivních sloučenin z kultivovaného houbového mycelia má výhodu kontroluje se kvalita surovin a výtěžnost biologicky aktivních látek. Biotechnologické techniky, jako je optimalizace složení živného média, kultivačních podmínek, fáze dokončení kultivace atd., umožňují získat soubor biologicky aktivních látek v daném poměru.

Xylotrofní bazidiomyceta Daedaleopsis tricolor ( Daedaleopsis tricolor ) je poměrně málo prozkoumaným objektem. Je však známo, že triterpeny izolované z této houby mají antibakteriální a antioxidační aktivitu [10]. Vodný extrakt z plodnice Daedaleopsis tricolor současně vykazuje protinádorovou aktivitu [9].

V tomto ohledu je studium této bazidiomycety z biotopů západní Sibiře, stejně jako extraktů z ní získaných, naléhavým úkolem.

Účelem práce bylo izolovat houbu Daedaleopsis tricolor do čisté kultury, získat extrakty z plodnice a myceliální hmoty houby a prostudovat obsah hlavních skupin biologicky aktivních látek a biologickou aktivitu získaných extraktů. .

Materiály a metody výzkumu

V práci byly použity sušené plodnice hub nasbírané v lesích u obce Vyuny v okrese Kolyvan v Novosibirské oblasti. z mrtvé břízy Betula pendula, stejně jako v okolí obce. Koltsovo v Novosibirské oblasti z břízy Betula pendula a vrby Salix alba, stejně jako myceliální biomasa získaná v kultuře založené na kmenech Daedaleopsis tricolor námi izolovaných z plodnic.

Izolace houby do kultury byla prováděna převážně z pletiv plodnice. Kousky plodnice byly umístěny na agarové živné médium v ​​Petriho miskách. Po 6–8 dnech bylo na živném médiu pozorováno mladé rostoucí mycelium. Dále byla kultura purifikována z mikromycet za použití řady subkultur na miskách s agarovým médiem. Byla použita dvě živná média: agarizovaný ovesný bujón a obohacené médium na bázi melasy a kukuřičného extraktu [3].

Pro suspenzní a povrchovou kultivaci bylo použito glukózo-peptonové médium (GPS) o složení (g/l): glukóza – 30,0 g; pepton – 5,0 g; kvasnicový extrakt – 2,0 g; KH2PO4 – 1,0 g; MgSO4 – 0,5 g [3]. Proces hloubkové kultivace byl prováděn v baňkách o objemu 500 ml ve 100 ml GPS na kruhových vahadlech při rychlosti rotace 190 ot./min, teplotě (26 ± 2) °C po dobu 5–7 dní, za použití 2–3 dny staré jako semenný materiál inokulum hluboké kultury pěstované na stejném médiu v množství 20 % objemových. Povrchová kultivace na tekutém živném médiu byla prováděna při pokojové teplotě ve stejných skleněných lahvích, umístěných ve vodorovné poloze, po dobu 27 dnů na tmavém místě a 6 dnů v rozptýleném světle (celková doba kultivace – 33 dnů). Biomasa získaná metodami povrchové a hloubkové kultivace byla separována, promyta z kultivační kapaliny destilovanou vodou, sušena při teplotě 60 °C a rozdrcena v porcelánovém hmoždíři.

Ze suché drcené plodnice a suché biomasy pěstované houby byly získány vodné a ethanolové extrakty. Pro získání suchých ethanolových extraktů jsme použili metodu čtyřnásobné frakční macerace 70% etanolem při teplotě 60 °C a poměru suroviny k extrakčnímu činidlu 1:50, s celkovou dobou extrakce 4 hodiny. Při získávání suchých vodných extraktů byla surovina s vodou zahřívána na 95–100 °C v baňce s refluxem po dobu 1 hodiny, extrakt byl oddělen a postup byl opakován. Poměr surovin k extrakčnímu činidlu byl 1:50. Ochlazené extrakty byly zfiltrovány, odpařeny a vysušeny při 60 °C.

Kvalitativní analýza karotenoidů, flavonoidů a triterpenů byla provedena pomocí TLC. Obsah bílkovin ve vzorcích byl stanoven Bradfordovou metodou, polysacharidy byly analyzovány Dreywoodovou metodou upravenou [5]. Kvantitativní obsah fenolických sloučenin v extraktech byl stanoven Folin-Cicolteovou redoxní reakcí [6]. Obsah karotenoidů byl analyzován spektrofotometricky na β-karoten [4].

Redukční schopnost extraktů byla hodnocena metodou FRAP [7]. Antioxidační aktivita extraktů byla studována při oxidační reakci Tween-80 se vzdušným kyslíkem [6]. Při studiu antioxidační, včetně železo-redukující, aktivity extraktů byly použity pozitivní kontroly (srovnávací vzorky), a to léky s antioxidační aktivitou: kyselina gallová, arbutin, kyselina askorbová, dihydroquercetin.

Analýza protinádorové aktivity získaných extraktů byla provedena počítáním buněk v Goryaevově komoře s použitím buněčné kultury Hep-2 (lidský laryngeální karcinom). Jako kontrola byly použity buněčné linie MDCK a Vero.

Statistické zpracování výsledků bylo provedeno pomocí obecně uznávaných metod s použitím softwarového balíku pro analýzu dat Microsoft Excel.

Výsledky výzkumu a diskuse

Tři kmeny bazidiomycetní houby Daedaleopsis tricolor byly izolovány do čisté kultury z plodnic odebraných z různých substrátů a z různých míst růstu v oblasti Novosibirsku. Kmen Db-14 byl izolován z plodnic odebraných u obce Vyuny v Kolyvanské oblasti, kmen Db-18 byl izolován z plodnic v okolí obce. Koltsovo v Novosibirské oblasti z břízy Betula pendula, kmen Dr-17 – z plodnic, v okolí obce. Prsten z vrby Salix alba.

Studiem kulturních a morfologických charakteristik kmenů Daedaleopsis tricolor bylo zjištěno, že v kultuře tvoří husté kolonie, nejprve bílé a 14.–16. den růstu – písčité nebo hnědé. Mikroskopické vyšetření (zvětšení 400, 1000) odhalí slabě rozvětvené přepážkové mycelium s četnými jednotypovými přezkami, generativní hyfy jsou bezbarvé.

Na základě izolovaných kmenů pomocí metod hluboké a povrchové kultivace v glukózo-peptonovém médiu byla získána biomasa mycelia houby Daedaleopsis tricolor. Obsah suché biomasy houbového mycelia pěstovaného hloubkovou metodou po dobu 7 dnů se pohyboval od 5,1 do 7,4 g/l, přičemž pro získání 5,6 až 7,7 g/l suché biomasy mycelia povrchovou kultivací to trvalo 33 dnů.

Suché extrakty z plodnic a kultivované mycelium houby Daedaleopsis tricolor byly charakterizovány fyzikálně-chemickými parametry. Všechny extrakty vykazovaly přítomnost polysacharidů, proteinů a fenolických sloučenin. V etanolových extraktech byly nalezeny karotenody a triterpeny, a to jak z plodnic houby, tak z podhoubí, zatímco ve vodných extraktech tyto skupiny biologicky aktivních látek nebyly. Bylo prokázáno, že výtěžnost extraktivních látek z podhoubí je 3–5krát vyšší než z plodnice, zatímco obsah některých skupin biologicky aktivních látek v extraktech z plodnic houby je 2–4krát vyšší. než v extraktech z mycelia. Obsah polysacharidů ve vodných extraktech z houby je o něco vyšší než v ethanolových extraktech, zároveň je obsah fenolických sloučenin a flavonoidů v ethanolových extraktech z houby obecně vyšší než ve vodných extraktech (tab. 1, 2).

Fyzikálně-chemické vlastnosti extraktů z plodnic Daedaleopsis tricolor v závislosti na substrátu, na kterém houby rostly